Studio in vitro dell’attivita’ microbicida di ovuli a base di tea tree oil su Candida spp. e probiotici del microbiota vaginale

Dati epidemiologici indicano che, nel 13% delle donne, il trattamento topico per le candidosi non è sempre sufficiente a decontaminare completamente il microambiente vaginale tanto che, spesso si verificano recidive. Il disagio causato spinge sempre più donne verso l’uso, sotto prescrizione medica o per automedicazione, di prodotti naturali, facilmente reperibili presso le farmacie, per la cura e/o prevenzione di patologie. Lo scopo di questo lavoro è stato di valutare, in vitro, l’azione fungicida e battericida di ovuli vaginali (OV) a base di sostanze naturali rispettivamente su ceppi di Candida spp e di probiotici appartenenti al microbiota vaginale. A tal fine, dalla letteratura, il Tea Tree Oil (TTO) risulta il miglior candidato sia per la bassa tossicità a concentrazioni < al 20%, che per l’attività fungicida anche verso ceppi resistenti ai farmaci. Per lo studio sono stati usati i seguenti ceppi di Candida: C. albicans ATCC 10231, C. tropicalis ATCC 201380, un ceppo di C. albicans azolo-resistente ed uno sensibile fortemente vaginopatico oltre a 15 ceppi di Candida isolati presso l’ospedale SFN di Roma. La sensibilità è stata testata mediante macro-brododiluizione, inoculando 2.5x103 cfu di ciascun ceppo in OV a base di TTO (Candinorm ® Pegaso), OV placebo, TTO (0.5% v/v) e gel di Aloe (0.5% v/v). Dopo 24h, 10l delle soluzioni inoculate (SI) sono state piastrate su cromagar e sia gli OV che il TTO, singolo o in combinazione con il gel di Aloe, hanno mostrato azione fungicida a 24, 48 e 72h; il placebo ed il gel di Aloe non hanno mostrato alcuna azione fungicida o fungistatica. Analogamente è stata studiata la sensibilità agli OV di 4x1010cfu di ceppi probiotici di Bifidobacterium animalis (BA) subsp. lactis (DSM 10140) e di 5x1010 cfu di Lactobacillus (LB) spp. (Lb. casei R-215, Lb. acidophilus R-52 isolati da AxiDophilus ® Pegaso), dopo 18/20h a 37°C sono stati seminati 10-100µl e 1 ml di SI su agar nutritivo. Dopo 4 gg in anaerobiosi solo il ceppo BA risulta inibito nella crescita mentre non si osserva inibizione per i ceppi di LB. Test di micro-brododiluizione mostrano l’azione battericida del TTO per concentrazioni ≥4% mentre sia BA che LB sono vitali a concentrazioni ≤2%. Tutti i test sono stati eseguiti in conformità con le linee guida CLSI. I dati mostrano come gli OV a base di TTO esercitano in-vitro un’azione fungicida selettiva, lasciando pressoché inalterata la vitalità dei probiotici testati e supportandone l’uso nel trattamento delle candidosi vaginali.