Analisi HPLC-ED-MEPS di catecolamine in plasma

Le catecolamine (adrenalina, noradrenalina e dopamina) sono sostanze che possiedono un gruppo aminico legato ad un gruppo catecolico. Sono sintetizzate dalle cellule cromaffini della midollare del surrene, dal Sistema Nervoso Centrale (SNC) e dalle terminazioni nervose simpatiche a partire dalla tirosina. Gli effetti fisiologici delle catecolamine si manifestano a seconda del recettore periferico coinvolto. A livello del SNC giocano un ruolo estremamente importante come neuromediatori. La loro produzione endogena può aumentare considerevolmente in seguito a stimoli come stress, ipossia e ipoglicemia. Tumori del tessuto cromaffine, soprattutto il feocromocitoma, ma anche neuroblastomi e ganglioneuromi sono responsabili di incrementi significativi delle catecolamine. Inoltre, i livelli plasmatici di catecolamine possono essere considerati importanti markers neuroendocrini, per stabilire correlazioni significative con alcuni aspetti psicosociali degli individui. Il metabolismo delle catecolamine avviene ad opera delle monoamino ossidasi (MAO) e delle catecol-O-metil transferasi (COMT) con formazione di molti metaboliti come l’MHPG (per la noradrenalina) e il DOPAC (per la dopamina). Scopo del presente studio è la messa a punto di un metodo HPLC per l’analisi simultanea di noradrenalina, adrenalina e dopamina oltre ad alcuni metaboliti in matrici plasmatiche. Il detector elettrochimico di tipo coulombometrico è stato scelto per la rivelazione degli analiti grazie all’elevata sensibilità (sub e ultra-microanalisi) che permette di dosare anche livelli di analiti dell’ordine dei ppt. Il pretrattamento dei campioni biologici è stato effettuato utilizzando la microestrazione in fase solida impaccata (MEPS) che ha permesso di ottenere buoni risultati in termini di resa d’estrazione e clean-up dei campioni. Il metodo è in fase di convalida.