Per stabilire la azione del gene PAC1 (ribonucleasi ds-RNA specifica di tipo III di lievito Schizosaccharomyces pombe) sulla resistenza di piante di Nicotiana tabacum all’infezione dei virus PVY (potato virus Y) e PVX (potato virus X), abbiamo trasformato le suddette piante con un costrutto (pBI121-PAC1), fornitoci dal Prof. Gallitelli. Il vettore binario pBI121- PAC1 è stato trasferito in cellule di Agrobacterium tumefaciens LBA 4404 utilizzate per la trasformazione. Dagli espianti di tessuti infettati con A. tumefaciens si sono sviluppati diversi germogli che, dopo aver radicato su terreno selettivo con kanamicina (50 mg/ml), sono stati trapiantati in vaso e allevati in serra climatizzata. Cinque delle piantine derivate sono state trapiantate ed allevate fino alla formazione del seme. Gli studi condotti sulla generazione R1 ci hanno portato a stabilire l’ integrazione del gene nel genoma vegetale e ad identificare il relativo trascritto. Dal rapporto fra semi germinati e non sul terreno differenziale con kanamicina si è dedotto che il trangene era presente in singola copia e in forma stabile nel genoma delle piante. Prove di infezione con PVY alle concentrazioni di inoculo di 1 , 0.5 e 0.1 mg/ml e con PVX alle concentrazioni di 1, 0.1 e 0.05 mg/ml, non hanno però statisticamente dimostrato la acquisizione di resistenza da parte delle piante transgeniche. Vengono ipotizzate le possibile cause di non azione del transgene. Prove simili con l’utilizzazione di un costrutto analogo da noi prodotto sono in corso di attuazione per sostanziare i risultati ottenuti. .
Effetti del transgene pac1 di Schizosaccaromyces pombe sulle infezioni di pvx e pvy in tabacco
CONTALDO, NICOLETTA;COLALONGO, MARIA CHIARA;FACCIOLI, GIANNI
2005
Abstract
Per stabilire la azione del gene PAC1 (ribonucleasi ds-RNA specifica di tipo III di lievito Schizosaccharomyces pombe) sulla resistenza di piante di Nicotiana tabacum all’infezione dei virus PVY (potato virus Y) e PVX (potato virus X), abbiamo trasformato le suddette piante con un costrutto (pBI121-PAC1), fornitoci dal Prof. Gallitelli. Il vettore binario pBI121- PAC1 è stato trasferito in cellule di Agrobacterium tumefaciens LBA 4404 utilizzate per la trasformazione. Dagli espianti di tessuti infettati con A. tumefaciens si sono sviluppati diversi germogli che, dopo aver radicato su terreno selettivo con kanamicina (50 mg/ml), sono stati trapiantati in vaso e allevati in serra climatizzata. Cinque delle piantine derivate sono state trapiantate ed allevate fino alla formazione del seme. Gli studi condotti sulla generazione R1 ci hanno portato a stabilire l’ integrazione del gene nel genoma vegetale e ad identificare il relativo trascritto. Dal rapporto fra semi germinati e non sul terreno differenziale con kanamicina si è dedotto che il trangene era presente in singola copia e in forma stabile nel genoma delle piante. Prove di infezione con PVY alle concentrazioni di inoculo di 1 , 0.5 e 0.1 mg/ml e con PVX alle concentrazioni di 1, 0.1 e 0.05 mg/ml, non hanno però statisticamente dimostrato la acquisizione di resistenza da parte delle piante transgeniche. Vengono ipotizzate le possibile cause di non azione del transgene. Prove simili con l’utilizzazione di un costrutto analogo da noi prodotto sono in corso di attuazione per sostanziare i risultati ottenuti. .I documenti in IRIS sono protetti da copyright e tutti i diritti sono riservati, salvo diversa indicazione.
